1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1、糖化酶的介绍 1.1 糖化酶的定义 糖化酶，又称葡萄糖淀粉酶［glucoamylase，系统命名为淀粉 α-1，4- 葡聚糖葡萄糖水解酶，α-1，4-glucanglucohydrolase（ec.3.2.1.3）］， 是一种具有外切活性的酶，它能把淀粉、糊精、糖原等从非还原性末端水解α-1，4- 葡萄糖苷键，而得到终产物β-d-葡萄糖，也能缓慢水解α-1，6- 葡萄糖苷键或α-1，3- 葡萄糖苷键，转化为葡萄糖［1-3］。

1.2糖化酶的作用方式 糖化酶的底物专一性较低，它除了能从淀粉链的非还原性未端切开a-1.4键处，也能缓慢切开a-1.6。

因此，它能很快的把直链淀粉从非还原性未端依次切下葡萄单位，在遇到1.6键分割，先将a-1.6键分割，再将a-1.4键分割，从而使支链淀粉水解成葡萄糖。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.基本内容： 耐辐射奇异球菌来源糖化酶的克隆、表达和酶学性质研究 2.拟解决的关键问题： ①糖化酶基因的获得； ②糖化酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达； ③糖化酶的提纯和酶学性质研究 3.研究的方法与技术路线： 酶学性质研究： ①最适反应温度及热稳定性 ： 在不同温度下按照标准方法测定酶活,以酶活最高者为 100%.热稳定性试验中测残余酶相对活力,以未保温的酶液的酶活为 100%。

②酶的最适反应 ph 值及 ph 值稳定性 ： 将酶液分别用不同浓度梯度的缓冲液稀释,按标准方法测酶活力。

分子克隆基本流程图：