摘 要

第一节 化学试剂与仪器 5

1.1 主要原料及规格 5

1.2 实验仪器 6

1.3 化学试剂的预处理 7

第二节 基本原料的合成及表征 7

2.1 荧光单体（2-羟基乙基丙烯酸-9-蒽甲酸酯，AnHEMA）的合成 7

2.2 表面含有ATRP引发基团和环氧基团的荧光聚合物微球（poly(GMA-co-EGDMA)）的制备 8

2.3 荧光聚合物微球的表面修饰 9

2.4 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的合成 9

2.5 荧光MIPs表征与测试方法 10

第三节 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的的合成以及形貌、结构研究 11

3.1 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的合成原理及其路线 11

3.2 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的形貌研究 12

3.3 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的结构研究 13

第四节 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的吸附性能研究 14

4.1 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的平衡吸附性能 14

4.2 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的竞争吸附性能研究 14

第五节 适于糖蛋白检测的荧光MIPs的荧光性能研究 15

5.1 不同荧光单体含量poly(GMA-co-EGDMA) 对卵清蛋白的荧光响应研究 15

5.2 不同反应时间荧光MIPs荧光响应性能研究 16

5.3 适于糖蛋白检测的荧光MIPs荧光性质随模板浓度变化的研究 17

5.4 适于糖蛋白检测的荧光MIPs荧光竞争研究 17

5.5 荧光MIPs实际样品中回收率测试 18

第六节 本章小结 19

参考文献： 20

适用于糖蛋白检测用的荧光性MIPs传感微球的可控制备及其性能研究

前言

分子印迹技术是基于抗原与抗体，酶与底物相互作用原理而制备对某一特定分子具有特异性识别作用的聚合物的过程，所制备的产物称为分子印迹聚合物（MIPs）

近些年来，生物传感器因其优异的特异性和灵敏性引起了国内外众多研究者的关注，并广泛地应用于分析化学、生物工程、质量控制、环境检测、医学等领域。但是，生物传感器存在致命的缺陷，例如耐温耐化学试剂差，只有特定条件下才能产生感应，这些限制了生物传感器的进一步应用。而MIPs具有耐酸、耐碱、耐高温性强、制备简单、稳定性好以及选择性高等特性，以这种高分子材料作为传感器上的识别元件制备的仿生传感器，可以解决生物传感器的众多缺点，为传感器的推广提供强有力的技术支持。其中荧光作为一种光学性能，具有良好的检测灵敏度，将分子印迹的识别性能转换为荧光信号，建立检测物浓度与荧光信号的关系，实现目标物的实时监测，显得尤为有意义。

沉淀聚合的原理为功能单体、交联剂、引发剂在反应前都能够溶于反应介质，而反应产物不溶于反应介质，所以一旦低聚物在反应体系中形成便以沉淀的形成析出。沉淀聚合与本体聚合、乳液聚合以及悬浮聚合相比具有突出的优点：（1）与本体聚合相比，其不用研磨，过筛；（2）与悬浮聚合、乳液聚合相比，聚合过程中不需要加入表面活性剂或者乳化剂，简化了后处理步骤，同时以生物分子为模板的MIPs能够使用沉淀聚合制备, 避免了表面活性剂或者乳化剂对蛋白或者病毒结构的破坏；（3）制备方法简单，通过调节反应条件可以得到粒径均匀的微米或纳米尺寸的聚合物球；（4）使用质子惰性的极性溶剂可以很好的保持模板与功能单体的非共价作用，有利于印迹效果的形成。

摘要

糖蛋白占哺乳动物中所含总蛋白的50%，其在分子识别、细胞内或细胞间的信号传递、免疫反应等生物过程中起决定性作用；同时在临床医学上，许多糖蛋白还是疾病生物指针和治疗的目标物，因此发展高性能的糖蛋白分离纯化和检测材料具有重要意义。一般情况下，质谱被认为是糖蛋白分析中的有力工具之一，但是质谱几乎不可能直接用于分析未经预处理的糖蛋白。另外，生物样本尤其是蛋白质，会在质谱分析过程中被破坏。因此发展一种可直接检测糖蛋白的新型传感器具有重要的意义和研究价值。

本课题将可控/“活性”自由基沉淀技术与表面引发的可控自由基聚合相结合，基于硼酸基团与糖蛋白间的可逆化学作用，加入具有可聚合的荧光单体，发展一种荧光MIPs，为临床检测糖蛋白提供一种简单、高效的临床诊断工具。

Abstract

Glycoproteins account for 50% of the total proteins contained in mammals. They play a decisive role in biological processes such as molecular recognition, intracellular or intercellular signaling, and immune reactions. At the same time, many glycoproteins are also disease organisms in clinical medicine. The targeting and therapeutic targets are therefore of great significance for the development of high-performance glycoproteins for the separation and purification and detection of materials. In general, mass spectrometry is considered to be one of the powerful tools in the analysis of glycoproteins, but mass spectrometry is almost impossible to directly use for the analysis of non-pretreated glycoproteins. In addition, biological samples, especially proteins, are destroyed during mass spectrometry. Therefore, it is of great significance and research value to develop a novel sensor that can directly detect glycoproteins.
This project combines controllable/“active” free radical precipitation techniques with surface-initiated controlled free radical polymerization, based on the reversible chemical interaction between boric acid groups and glycoproteins, and the addition of polymerizable fluorescent monomers to develop a Fluorescent MIPs provide a simple and efficient clinical diagnostic tool for the clinical detection of glycoproteins.

第一节 化学试剂与仪器

• 1. 主要原料及规格

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