摘 要

“瘦肉精”是β-肾上腺受体激动剂这一类化合物的简称。目前常用的“瘦肉精”包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等物质。本文对“瘦肉精”的国标检测方法与ELISA和胶体金快检方法进行比较：①高效液相色谱-质谱联用检测时间：样品前处理时间约16h，液质检测时间约2h；②ELISA检测时间：样品处理约2h，检测时间约10min；③胶体金检测时间：样品处理约0.5h，检测时间约5min。结论：胶体金快速检测卡简便快速，但检测限相对较高，容易受到操作、环境等因素影响，尤其是在对结果的判断上存在一定的人为差异，且试验可重复性差，假阳性率较高；高效液相色谱法-质谱联用法，准确性最高，但是实验时间较长，操作复杂繁琐；ELISA法准确性较高，同时操作简单，耗时较少。因此，“瘦肉精”检测可以先通过ELISA法进行初筛，然后用液质方法进行验证。

关键词：瘦肉精 液质 准确性 检测

ABSTRACT

Clenbuterol is beta adrenal agonists short for this kind of compounds. The current commonly used "clenbuterol" including clenbuterol hydrochloride, salbutamol, lake dopamine and other substances. In this paper, the "clenbuterol" national standard test method compared with ELISA and colloidal gold fast inspection methods: (1) high performance liquid chromatography - mass spectrometry detection time: sample preparation time is about 16 h, 2 h liquid mass detection time; (2) ELISA detection time: about 2 h sample processing, testing time for 10 min; (3) colloidal gold detection time: the sample is about 0.5 h, testing time is about 5 min. Conclusion: colloidal gold rapid detection card is simple and rapid, but relatively high detection limit of vulnerable to manipulation, environmental factors, such as particularly in the judgment of the results there exist certain differences, and test repeatability is poor, high false positive rate; High performance liquid chromatography - mass spectrometry, ia the highest accuracy, but the experiment for a long time, operation complexity; ELISA method the accuracy is higher, at the same time, the operation is simple and less time-consuming. Therefore, "clenbuterol" could be detected by ELISA method in early screening, and then use liquid mass method is validated.

Key Words: clenbuterol Liquid mass accuracy detection

摘 要 I

ABSTRACT II

第一章 文献综述 1

1.1引言 1

1.1.2瘦肉精的特点 2

1.1.3瘦肉精的用途 2

1.1.4瘦肉精的危害 2

1.1.5临床表现 3

1.1.6瘦肉精事件 4

1.2检测及方法 4

第二章 实验内容 10

2.1实验试剂和材料 10

2.1.1液相色谱串联质谱法 10

2.1.2 ELISA 10

2.1.3 胶体金检测卡 10

2.2实验仪器设备与条件 10

2.2.1国标方法（液质） 10

2.2.2 酶联免疫快速检测试剂盒（ELISA） 11

2.2.3 瘦肉精快速检测试剂盒（胶体金） 11

2.3实验方法 11

2.3.1国标法检测“瘦肉精” 11

2.3.2 酶联免疫快速检测（ELISA） 14

2.3.3瘦肉精快速检测卡（胶体金） 16

第三章 结论与展望 18

3.1结论 18

3.2展望 18

参考文献 19

致谢 20

第一章 文献综述

1.1引言

瘦肉精：

β-肾上腺受体激动剂这一类化合物的简称叫做“瘦肉精”。目前，常用“瘦肉精”的主要成分一般是盐酸克伦特罗^[1]，是一种白色、类白色的粉末状的结晶体，味苦，主要以肝脏作为样本进行稳定性研究，利用了克仑特罗容易残留在动物的肝脏内的特点，还有以肌肉组织作为研究对象的。在烧煮烤微波等情况下没有明显变化。因此，会出现部分的残留物进入到组织周围的环境或烹饪加工过程中溢出的肉汁中的情况。油炸过程与其他烹饪加工过程的方式不同，前者会影响克仑特罗残留，温度越高，残留量会越少。盐酸克仑特罗高温的热油中是不稳定的，从而可知我们通常的烹饪加工过程无法将克伦特罗破坏^[2]。它能通过天然儿茶酚胺衍生合成^[3] 。1964年获得专利^[4]，它被发现具有增强心脏的收缩力、扩张骨骼肌和血管、支气管平滑肌细胞等生理作用，克伦特罗最早用于预防哮喘、治疗休克和支气管痉挛等病症，后来由于它有强烈的副作用而停止了作为药物的使用^[5]。由于其具有增加瘦体重的影响，瘦肉精被一些运动员滥用，因此被国际禁止^[6]。瘦肉精的药代动力学特点包括一个长的半衰期在等离子体(估计t=35小时)和缓慢的肾排泄率^[7]。只有略微主要的在肝脏代谢和不变的格式在排泄尿液中。被报道的二期代谢物的瘦肉精部分是硫酸葡糖苷酸在人类尿液排泄中^[8]。瘦肉精的检测在医学研究，兽医和反兴奋剂领域是由各种各样的方法，包括免疫测定^[9]、毛细管电泳分析^[10]和色谱—光谱技术^[11]进行检测的。

20 世纪 80 年代早期，如果在饲料中添加一定量的盐酸克伦特罗后，猪的瘦肉率的明显提高，这一现象被美国研究人员所发现。随后，在猪的饲养行业这一现象作为科研成果大范围的运用起来。但是1994 年出现了大批量的盐酸克伦特罗中毒事件后，调查中发现是由于食用了猪肺、 肝而导致的。早在1997 年初，我国管理部门就禁止将“瘦肉精”加入到动物食用的饲料和饮用水中，但是在饲料中添加多种“瘦肉精”的情况仍然发生，中毒事件也经常发生，但是检测工作却始终拖延。

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