油菜悬浮细胞体系的建立开题报告
2020-05-16 20:18:09
1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
文 献 综 述
1 植物细胞悬浮培养研究概况
1.1植物细胞悬浮培养的概念和特点
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
2.1本课题要研究或解决的问题
通过实验建立油菜细胞的悬浮体系，为植株悬浮培养做准备，服务于油菜优良抗性基因品种的选育和外源基因转化的研究，最终提高油菜产量。
2.2研究手段和途径
2.2.1实验设计
2.2.1.1无菌苗的获取
①对油菜种子进行无菌处理，分别研究两种消毒试剂复合方案作用下的染菌率
第一种：先用75%的酒精处理70s,再使用3%(v/v)NaClO处理10min
第二种：先用75%的酒精处理70s,再使用0.1%HgCl2 处理10min
比较NaClO和HgCl2消毒效果
②选择最优消毒剂，并记录发芽率。
2.2.1.2愈伤组织诱导
研究不同浓度的2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)对愈伤组织出愈率、外观形态和生理状态的影响，选择最适的激素浓度。
①选取不同激素浓度组合进行实验，以确定适合的浓度组合
选取0.1、0.3、0.5mg/L浓度的6-BA分别对应五个浓度的2,4-D进行实验
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编号/NO |
2,4-D浓度mg/L |
6-BA浓度mg/L |
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1 |
1 |
0.1 |
|
2 |
1 |
0.3 |
|
3 |
1 |
0.5 |
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4 |
1.5 |
0.1 |
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5 |
1.5 |
0.3 |
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6 |
1.5 |
0.5 |
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7 |
2 |
0.1 |
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8 |
2 |
0.3 |
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9 |
2 |
0.5 |
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10 |
2.5 |
0.1 |
|
11 |
2.5 |
0.3 |
|
12 |
2.5 |
0.5 |
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13 |
3 |
0.1 |
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14 |
3 |
0.3 |
|
15 |
3 |
0.5 |
2.2.1.3悬浮细胞体系的建立
①得到了适合的愈伤组织后，进行液体培养基的选择
分别选取BA、AA、B5液体培养基进行培养，观察记录悬浮细胞的生长情况。
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培养基类型 |
愈伤组织生长情况 |
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BA |
|
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AA |
|
|
B5 |
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②确定液体培养基的类型
