摘 要

牛至油是一种具有抑菌性和抗氧化性的天然植物精油。本研究以牛至油为研究对象，初步探讨了牛至油对食品中的常见致病菌金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、假丝酵母菌的抑菌效果。并测定牛至油对这8种常见菌的最小抑菌浓度（MIC）值，实验结果表明，牛至油具有低浓度高效抑菌性，对八种上述常见致病菌的最小抑菌浓度值分别为，大肠杆菌MIC400mg/L；金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉菌均为MIC200mg/L；假丝酵母MIC100mg/L，并通过显微镜下观察，探讨牛至精油的抑菌机理可能是通过作用于微生物细胞膜，使其细胞膜的形态和结构发生改变，进一步使细胞裂解死亡。本实验结果为拓展牛至精油的应用领域提供一定的理论参考。

关键词：牛至油 抑菌性 MIC值 常量肉汤稀释法

Oregano oil detection of common pathogenic antibacterial effect in food by broth dilution method

ABSTRACT

Oregano oil is a kind of antimicrobial resistance and oxidation resistance of natural plant oils. In this study, the research object oregano oil, oregano oil was discussed in the common food pathogen Staphylococcus aureus, Salmonella, E. coli, Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, Bacillus subtilis, Aspergillus niger, Candida inhibitory effect. Determination of oregano oil and these eight kinds of common bacteria minimum inhibitory concentration (MIC) values, results showed that oregano oil has a low concentration of effective antimicrobial activity, the minimum inhibitory concentration values above eight kinds of common pathogenic bacteria respectively, E. coli MIC400mg / L; Staphylococcus aureus, Salmonella, Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, Bacillus subtilis and Aspergillus niger are MIC200mg / L; Candida MIC100mg / L, and by under the microscope, to explore the mechanism of inhibition oregano essential oils may be by acting on the microbial cell membranes to form and structure of the cell membrane changes, further to lyse the cells die. Our results for the expansion of application fields oregano essential oils to provide a theoretical reference.

Key words: oregano oil ;antibacterial ;MIC value;broth dilution method

目 录

摘 要 I

ABSTRACT II

第一章 前言 1

1.1牛至油概述 1

1.2 牛至油的提取方法 1

1.4 牛至油的应用及研究现状 3

1.5 引起食品腐败变质的微生物种类 5

1.5 本文研究内容 6

1.6 研究意义 6

第二章 实验方法 7

2.1 牛至油含量测定 7

2.1.1 试验材料和仪器 7

2.1.1.1 材料和试剂 7

2.1.1.2 试验仪器和设备 7

2.1.2 试验方法 7

2.1.2.1气象色谱条件 7

2.1.2.2 标准溶液配制 8

2.3.3 样品配制 8

2.3.4 标准曲线绘制 8

2.1.3结果与分析 9

2.2 最小抑菌浓度MIC的测定 9

2.2.1 肉汤稀释法 9

2.2.2 试验材料和仪器 10

2.2.2.1 试剂 10

2.2.2.2仪器与设备 10

2.2.2.3受试菌种 10

2.2.4试验方法 10

2.2.4.1仪器灭菌 10

2.2.4.2牛至油原液的稀释配制 11

2.2.4.3菌液制备 11

2.2.4.5试管肉汤稀释法 11

2.2.4.6结果判断方法 11

第三章 实验结果与分析 13

3.1牛至油对八种菌最小抑菌浓度的分析 13

3.1.1牛至油对沙门氏菌体外抑菌效果的研究 13

3.1.2牛至油对枯草芽孢杆菌体外抑菌效果的研究 13

3.1.3牛至油对金黄色葡萄球菌外抑菌效果的研究 14

3.1.4牛至油对假丝酵母外抑菌效果的研究 14

3.1.5牛至油对黑曲霉菌体外抑菌效果的研究 15

3.1.6牛至油对副溶血性弧菌体外抑菌效果的研究 16

3.1.7牛至油对单增李斯特菌体外抑菌效果的研究 17

3.1.8牛至油对大肠杆菌体外抑菌效果的研究 17

3.2试验结果与分析 18

3.3牛至油抑菌机理的探讨 18

3.2.1作用于细胞膜和细胞壁 19

3.2.2作用于细胞的呼吸氧化过程 20

3.2.3作用于酶和功能蛋白 20

参考文献 21

致 谢 23

第一章 前言

1.1牛至油概述

牛至为唇形科牛至属多年生草本植物，含有浓郁香气，植物组织可以提取芳香油。牛至自从古代就被种植，学名Ogrianum vulgre,常为雌花、两性花异株。由于它的作为草药具有治疗特性并且当前作为商业香味剂添加进许多不同种类的食品，在烹饪中也有使用。牛至属植物已被种植在埃及3000多年，古希腊人使用它自古典时代，而在英国从十三世纪开始被种植。一些牛至使用的最早资料记载可以追溯到公元前1600-1200年，那时植物的图像被小亚细亚、叙利亚的赫梯人记录在石碑上。当前全球有各种类型的牛至植物，属于唇形科的有260属7000种^[1]。牛至油即是从牛至植物组织中提取的植物精油，其成分会因为牛至植物种类差异、产地、提取季节不同而存在差异。

1.2 牛至油的提取方法^[2]

从植物精油提取的角度本来看目前有很多种方法，传统方法有浸提法、水蒸气蒸馏法、压榨法。现代的提取方法有吸附法、超临界萃取法、分子蒸馏法、液氮冷冻研磨法等等。各种提取方法不同而获得的精油提取率不尽相同，有时候精油成分含量也存在着差异。目前较为广泛使用的是水蒸气蒸馏法、微波提取和超临界提取技术，当然每种方法都有各自的局限性，在使用时需要根据提取对象的特征进行选择。

（1）压榨法

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