文 献 综 述

一、引言

孔雀石绿为金属光泽的结晶体,极易溶于水,水溶液呈蓝绿色,分子式C24H25CN2,是药用染料中抗菌效力较强的的一类,属于三苯甲烷类染料。一般用于防治鱼类的水霉病、烂鳃病以及寄生虫病等[1]。其在鱼体内可迅速代谢为隐色孔雀石绿。但是孔雀石绿具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用。因此在美国、日本、英国等许多国家已禁止其用于水产养殖业，我国农业部也于2002年将其列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》。然而因孔雀石绿在水产养殖中抗菌效果较好，价格低廉，宣传力度不够等原因，使得不少养殖户还在小范围内使用，因此对于孔雀石绿的监控就显得格外重要[2]。

二、孔雀石绿的危害

（1）急性毒性。孔雀石绿盐酸盐对小鼠经口急性毒性LD50为80mg kg，孔雀石绿草酸盐对大鼠经口急性毒性LD50为275mg kg，急性毒性属中等毒物质[3]。孔雀石绿对哺乳动物细胞具有高毒性，研究发现孔雀石绿与无色孔雀石绿均能使大鼠肝细胞空泡化，无色孔雀石绿还能使甲状腺滤泡上皮大量凋亡，减少公鼠甲状腺激素的释放；还能抑制血浆胆碱酯酶的作用，进而有可能造成乙酰胆碱的蓄积而出现神经症状。此外，它还能通过溶解足够的锌，引起水生动物急性锌中毒，并引起鱼类消化道、鳃和皮肤轻度发炎，从而影响鱼类的正常摄食和生长，能阻碍肠道酶，影响动物的消化吸收功能。

（2）高残留。近年来的研究发现,孔雀石绿特别是其代谢物在水产体内有明显的残留，残留时间达到100 d以上。孔雀石绿及无色孔雀石绿能迅速在组织中蓄积，其已在受精卵和鱼苗的血清、肝、肾、肌肉和其他组织中检测到。无色孔雀石绿由于不溶于水，残留毒性比孔雀石绿更强。（3）高致癌、致畸。孔雀石绿的化学官能团是三苯甲烷(triphenyml ethane)，其分子中与苯基相连的亚甲基和次甲基受苯环影响有较高的反应活性，可生成自由基-三苯甲基，使细胞凋亡出现异常，诱发肿瘤和脂质过氧化。孔雀石绿能致使淡水鱼卵染色体异常，当孔雀石绿浓度高于一定值时，软体动物的受精卵或是幼体都有不同程度的发育畸形[4]。

对于遗传性致癌物质，任何剂量下都有有限的不良反应的概率风险，只有零剂量才可能是零风险，因此，遗传毒性和致癌的物质属于无阈剂量的化学物质，一般不能采用”NOAEL-安全系数”方法来制定ADI值。现已证实，所有已知的人类化学致癌原，至少对 1种试验动物模型有致癌作用，因此，尽管化学物质诱发试验动物肿瘤与引起人类肿瘤之间的联系尚未完全确立，但在缺乏充分的人类致癌资料的情况下，一般都慎重地认为那些已肯定对动物致癌的化学物质，对人类也可能有潜在的致癌危害[5]。

三、检测法

孔雀石绿在水生动物体内会很快代谢成无色孔雀石绿，无色孔雀石绿的毒性甚至超过孔雀石绿。因此，有关法规对动物源性食品中孔雀石绿残留限量的规定都是以孔雀石绿和无色孔雀石绿的总量为限量指标，要求相关的检测方法能检测出孔雀石绿和无色孔雀石绿总量。目前，孔雀石绿的检测方法以理化检测法和免疫学检测法为主。理化检测法包括薄层层析法、分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱质谱联用检测法等。免疫学检测法主要是酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay ， ELISA)[6]。

这些方法在实际情况中存在不同的差异，且所需的条件，能达到什么样的精确度都是相对不同的，这几种方法在不同的场合各有各的优势，同时也有弊端。这里初步对几种常见的检测方法进行了解。