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毕业论文网 > 开题报告 > 化学化工与生命科学类 > 生物技术 > 正文

一种人工重组矿化蛋白ChiCaSifi的表达和纯化研究开题报告

 2020-02-27 10:49:26  

1. 研究目的与意义(文献综述)

1、目的及意义(含国内外的研究现状分析)
本研究通过构建多组氨酸标签的重组蛋白his-chicasifi,优化其表达纯化条件,然后研究其诱导矿化性能。

主要工作内容如下所示: ①提取ptwin[chicasifi]质粒,构建构建多组氨酸标签的重组蛋白his-chicasifi,在原核细胞大肠杆菌体内诱导表达获得所需目的蛋白质。

②探索不同诱导条件(温度、时间、iptg 浓度等),获得最优表达量。

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2. 研究的基本内容与方案

2、研究(设计)的基本内容、目标、拟采用的技术方案及措施
实验的主要内容:
① 提取ptwin[chicasifi]质粒,构建构建多组氨酸标签的重组蛋白his-chicasifi
② 在原核细胞大肠杆菌体内诱导表达获得所需目的蛋白质。


③ 探索不同诱导条件(温度、时间、iptg 浓度等),获得最优表达量。


④ 摸索不同纯化工艺(纯化时间、温度、过柱方式、结合时间),获得最大纯化量。

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3. 研究计划与安排

3、进度安排
第1周:了解论文题目,认识所需完成的主要内容和任务;搜集相关学术期刊、论文、文稿、专利、教材等资料,阅读后进行总结,对论题形成一个初步的系统性的认识。


第2-3 周:完成毕业论文开题报告,确定实验技术路线,确定具体的实验方案和步骤。


第4-8周:提取ptwin[chicasifi]质粒,构建构建多组氨酸标签的重组蛋白his-chicasifi,然后研究其表达、纯化和性能。

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4. 参考文献(12篇以上)

4.阅读的参考文献不少于15篇(其中近五年外文文献不少于3篇)
[1]Xiao-Li Wang, Hao Xie*, Bao-Lian Su, Yi-Bing Cheng, Jing-Jing Xie, Hang Ping, Meng-Hu Wang, Jin-Yong Zhang, Fan Zhang, Zhengyi Fu*. A bio-process inspired synthesis of vaterite (CaCO3), directed by a rationally designed multifunctional protein, ChiCaSifi, Journal of Materials Chemistry B, 2015, 3: 5951-5956. (Back Cover, SCI, IF 4.87)
[2]Wang TX, Colfen H, Antonietti M. Nonclassical crystallization: Mesocrystals and morphology change of CaCO3 crystals in the presence of a polyelectrolyte additive. J Am Chem Soc. 2005;127:3246-7.
[3]Xu A-W, Ma Y, Colfen H. Biomimetic mineralization. Journal of Materials Chemistry. 2007;17:415-49.
[4]Gehrke N, Colfen H, Pinna N, Antonietti M, Nassif N. Superstructures of calcium carbonate crystals by oriented attachment. Cryst Growth Des. 2005;5:1317-9.
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[6]C. Neinhuis and W. Barthlott, Ann. Bot., 1997, 79, 667.
[7]A. R. Parker and H. E. Townley, Nat. Nanotechnol., 2007, 2, 347.
[8]C. Ortiz and M. C. Boyce, Science, 2008, 319, 1053.
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[11]M. D. Brasier, O. R. Green, A. P. Jephcoat, A. K. Kleppe, M. J. van Kranendonk, J. F. Lindsay, A. Steele and N. V. Grassineau, Nature, 2002, 416, 76.
[12]A. W. Xu, Y. Ma and H. Colfen, J. Mater. Chem., 2007, 17, 415.
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[16]0 J. Huang, C. Zhang, Z. Ma, L. Xie and R. Zhang, Biochim. Biophys. Acta, 2007, 1770, 1037. 31 I. M. Weiss, S. Kaufmann, K. Mann


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