1. 毕业设计（论文）的内容和要求

论文内容本实验采用基因工程手段，构建双酶表达质粒pRSFDuet-UGTSL2-StSUS1，并导入大肠杆菌宿主。以大肠杆菌为宿主诱导表达产酶，以甜菊甙为底物，研究糖基转移酶UGTSL2催化合成莱胞迪甙E的性能，以及UGTSL2酶学性质的相关表征。

论文要求 1．文献查阅掌握文献查阅的一般方法，学会利用互联网在中国期刊网、维普数据库、超星数字图书馆、Web of Science科学引文索引、Springer Link电子期刊、Elsevier SDOS电子期刊等检索资源上查阅关于糖基转移酶基因及酶法合成莱胞迪甙D的相关文献，对本研究内容有广泛了解。 2．文献阅读及综述阅读与课题相关的中英文文献，了解国内外相关研究的动态，撰写文献综述。 3．明确实验任务，拟定实验方案根据所查阅文献的内容，确定实验内容及方案，拟定科学可行的研究计划。 4．开展实验研究学会使用生物信息学的各种软件进行数据分析并自主进行引物分析，找到正确的表达基因，进行扩增表达。掌握大肠杆菌基因工程基本操作、目标蛋白的表达调控及目的产物分析检测技术，探索相关实验条件并按计划进行实验。 5．处理实验数据和产品检测对所做实验进行如实、科学的记录及数据处理，对实验结果进行分析，归纳结论，提出改进方案和可行建议，验证结论。 6．撰写毕业论文对实验结果的数据进行归纳整理，系统分析并得出一般性结论。按照学校标准撰写毕业论文。

2. 参考文献

[1] de bruyn f, maertens j, beauprez j, et al. biotechnological advances in udp-sugar based glycosylation of small molecules [j]. biotechnology advances, 2015, 33(2):288~302.

[2] gantt r w, peltier-pain p, thorson j s. enzymatic methods for glycol (diversification/randomization) of drugs and small molecules [j]. nat prod rep, 2011, 28(11):1811~1853.

[3] cantarel b l, coutinho p m, rancurel c, et al. the carbohydrate-active enzymes database (cazy): an expert resource for glycogenomics [j]. nucleic acids research, 2009, 37(database): d233~d238.

3. 毕业设计（论文）进程安排

2019.1.11 -2019.2.24 查阅文献，熟悉课题有关背景，合理设计实验方案；

2019.2.25 -2019.3.25 将已有的含有糖基转移酶的重组质粒导入到大肠杆菌中，采用乳糖诱导培养基诱导产酶，催化甜菊甙合成莱胞迪甙e；

2019.3.26 -2019.5.31 对粗酶液ugtsl2进行蛋白纯化，对酶的酶学性质进行进一步的研究；