腺苷激酶过表达菌株的构建及酶活测定文献综述
2020-06-04 20:31:58
1.腺苷激酶 1.1简介 腺苷激酶 (adenosinekinase ,AK)是控制细胞中腺苷浓度的一种关键酶 ,在许多细胞和组织中都发挥着重要的生理效应子作用。
AK有5种同工酶:分别是来源于大肠杆菌(E.coli)的Ake,来源于酵母(yeast)的Aky以及来源于脊椎动物的AK1、AK2和AK3[1]。
后三种酶是依其在胞内所处的位置不同而划分的,其中AK1居细胞质的胞浆中;AK2位于线粒体的内外膜间,但在有些细胞的胞浆中也可找到少数AK2;AK3位于线粒体的基质中。
所有的AK酶都能催化如下的反应:MgNTP2- AMP2--MgNDP- ADP3-(N=A、G),以维持生物体内能荷的稳定。
除AK3外所有的AK同工酶都是以ATP作为磷酸根供体,只有AK3是以GTP作为磷酸根供体,推测AK4也是以GTP作为磷酸根供体,但尚未得到实验的证实。
1.2应用 腺苷激酶是合成腺苷酸的关键酶[2],能催化腺苷下生成AMP,进而磷酸化生成ATP、cAMP等重要产品。
MB Cassera等科学家通过基因组分析显示冈比亚疟蚊(AgAK;非洲传播的恶性疟原虫的最重要的载体)的腺苷激酶的蚊子直向同源物。
腺苷的特异性和紧密结合来Asn14,Leu16,Leu40,Leu133,Leu168,Phe168和Thr171的氢键相互作用以及Ile39和Phe168的主链与腺嘌呤环以及通过Asp18,Gly64和Asn68和核糖基2'-和3'-羟基。
该结构与人腺苷激酶的结构(48%相同)比来自弓形虫的AK的结构(31%相同)更相似。
由于对AgAK具有这种非凡的亲和力,腺苷被有效地捕获并在扩散极限附近转化为AMP,这表明该酶在维持腺嘌呤核苷酸池方面具有重要作用[3]。