1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 一、研究背景 1.解脂耶氏酵母 解脂耶氏酵母是fda公认安全（gras）的菌株，是研究非常规酵母的优良菌种，也是作为研究脂肪酸生产的产油细胞工厂的平台菌株[1]．。

在多个生产有价值生物化学品的工业领域被广泛应用，包括有机酸、ω-3脂肪酸二十碳五烯酸（epa）等不饱和脂肪酸，并已用于工业化生产单细胞蛋白[2]．。

最初，解脂耶氏酵母是从富含脂质的材料中分离出来的，因此，也被称为产油酵母。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究目标： 1）通过pt敲除法敲除ku70，构建ku70敲除菌。

2）构建过表达atp-柠檬酸裂解酶编码基因acl模块和敲除编码乙酰-coa:acp转脂酰基酶（acat）模块，通过同源重组方法将其导入ku70敲除菌中， 3）菌种发酵，通过液相色谱、气相色谱，确定解脂耶氏酵母胞质中乙酰-coa含量对产油脂的影响情况。

研究内容： 本课题在实验室现有对解脂耶氏酵母代谢研究的已有基础上，结合国内外对解脂耶氏酵母产油脂代谢途径优化的代谢工程和合成生物学方面研究，采用pt敲除法敲除ku70以破坏非同源末端连接修复提高同源重组效率的方法，在解脂耶氏酵母中以同源重组方法导入过表达acl、敲除acat模块来调控乙酰-coa含量，以野生对照菌po1f为对照，考察其对解脂耶氏酵母产油脂的影响。