论文总字数：16230字

摘 要

中国是一个人口大国，人口基数大，对粮食的需求远远高过于其他国家。随着全球变暖和水资源的稀缺导致了我国干旱面积在不断增大。干旱会导致作物减产，为了解决这类问题，农民们在培育庄稼的过程中大量使用肥料。虽然有效解决了作物的生长问题，生态环境也遭到了很大的破坏。此时微生物菌肥应运而生。微生物菌肥最大优点是不污染环境，是化肥所不能比的。本课题研究的骆驼刺泛菌就是一种能够提高植物抗旱性的微生物。

骆驼刺泛菌是革兰氏阴性菌，它在常温下活性低，且它从生产制备到交通运输，最后到投入使用这一系列过程都需要较长的时间，中途各种条件都可能导致骆驼刺泛菌失活，所以对于骆驼刺泛菌的保质期研究迫在眉睫。本实验在37 ℃的环境下培养骆驼刺泛菌，通过测定其光密度，绘制出其生长曲线，找到其对数生长期为6-8 h；取对数生长期的的菌体为种子，进行标准曲线的测定。结果表明骆驼刺泛菌的菌体浓度（CFU/mL）和吸光度 A600nm呈现一定的线性关系。采用加速实验计算出阿伦尼乌斯方程，可根据方程预测骆驼刺泛菌在不同温度下的保质期，大大缩减了科研工作的时间。

关键词：骆驼刺泛菌、生物防治、生长曲线、保质期

Study on the shelf life of pantoea alhagi

Abstract

• China is a large country with a large population, and its demand for food is much higher than that of other countries. With the global warming and the scarcity of water resources, the dry area of China is increasing. To deal with drought, which can lead to crop losses, farmers use more fertilizer to grow their crops.Although the problem of crop growth has been effectively solved, our ecological environment has also suffered great damage. At this time, microbial fertilizer came into being.The biggest advantage of microbial fertilizer is that it does not pollute the environment. The pantoea alhagi in this study is a kind of microorganism that can improve the drought resistance of plants.
• The pantoea alhagi is a gram-negative bacterium with low activity at room temperature. Moreover, it takes a long time from production preparation to transportation and finally to application. Various conditions may lead to inactivation of panicularia camellia during the process, so it is urgent to study the shelf life of pantoea alhagi. In this experiment, the growth curve of a. humatus was plotted by measuring its optical density. It was found that the logarithmic growth period was 6-8 h. The standard curve was measured by taking the fungus of logarithmic growth stage as the seed. The results showed that there was a linear relationship between the CFU/mL concentration and the absorbance of A600nm. The Arrhenius equation can be used to predict the shelf life of p. humatus at different temperatures, which greatly reduces the time of scientific research.

Keywords: Pantoea alhagi ;Biological control；growth curve；Shelf life

目录

摘要 I

Abstract II

第一章 绪论 1

1.1引言 1

1.2 骆驼刺泛菌的生物学特性研究 2

1.3 生长曲线与标准曲线绘制原理 3

1.4 保质期的计算方法 3

1.5 本课题主要研究内容 4

1.6本课题研究意义 4

第二章 实验部分 6

2.1 材料、试剂与设备 6

2.1.1 实验材料 6

2.1.2 培养基和溶液 6

2.1.3 主要试剂 7

2.1.4 仪器设备 7

2.2 骆驼刺泛菌的纯化与鉴定 8

2.2.1 骆驼刺泛菌的纯化和菌落形态观察 8

2.2.2 骆驼刺泛菌的菌体形态观察 8

2.2.3绘制生长曲线 9

2.3测定标准曲线 9

2.3.1 骆驼刺泛菌种子液原液的制备及浓度测定 9

2.3.2 骆驼刺泛菌标准曲线的绘制 9

2.4 骆驼刺泛菌的保质期研究 10

2.4.1 骆驼刺泛菌制剂的制备 10

2.4.2 保质期测定方法 10

2.4.3 保护剂聚谷氨酸对骆驼刺泛菌保质期影响的单因素实验 11

2.4.3.1 保护剂的配制 11

2.4.3.2 保质期测定实验 11

第三章 结果与分析 12

3.1 骆驼刺泛菌的鉴定与纯化 12

3.1.1 骆驼刺泛菌的形态结构观察 12

3.1.2 骆驼刺泛菌生长曲线的绘制 12

3.2 骆驼刺泛菌的标准曲线绘制 13

3.2.1 种子液的制备及浓度测定 13

3.2.2绘制标准曲线 14

3.3 聚谷氨酸保护剂对骆驼刺泛菌保质期影响的单因素试验结果 15

3.3.1 阿伦尼乌斯方程的建立 15

第四章 结论与展望 17

4.1结论 17

4.2展望 17

参考文献 18

致谢 21

第一章 绪论

1.1引言

土壤中的微生物在植物的生长过程中扮演着重要角色，它可以定植于植物根系形成共生组织，改善土壤环境，从而增强植物的抗病性，促进营养吸收 ^[4]。近年来，关于土壤微生物在植物生长发育中的应用层出不穷，尤其是微生物菌肥的应用。微生物菌肥是一种具有一定的活性微生物含量的生物制剂 ^[5]。在农业生产中化肥的过量使用造成土壤退化、环境恶化等问题加剧，相比下微生物菌肥对生态环境零污染。目前微生物菌肥在水果、蔬菜、马铃薯等农业生产中被广泛应用^[6]。

众所周知，干旱对于人类以及人类的生存环境有着致命的打击，随着近年来全球人口密度不断增大，水资源短缺日趋严重，导致了干旱化程度的加重^[1]。我国大部分地区属于亚洲季风区，所以受到干旱的影响较为巨大。钙离子在植物的生长过程中扮演着重要角色，它能够维持植物细胞膜与细胞壁的稳定性、参与细胞的信息传递以及改变果实的品质，干旱会导致植物体内钙离子含量下降 ^[2]。大量研究表明，干旱会抑制植物的光合作用，降低植物的发芽率；长时间的大量缺水会导致叶片的气孔闭合，导致植物的根部萎缩，影响植物的生长^[3]。据统计，干旱危害着我国1/2以上的植物，大约给我国造成每年20%以上的经济损失，所以我国对于抵御干旱带来的危害有着更加迫切的需求。

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