1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1.研究背景 1.1抗菌药物发现历史 人类对抗菌药物研究和发现已有千年的历史，一千多年前我们的祖先就开始服用大量”清热解毒药物”，如牛黄，冰片，薄荷等，缓解细菌引起的感染和炎症，而西方也有通过草药治疗细菌感染的记载。

很遗憾的是，这些手段并没有驱散盘踞在人类心头，细菌带来的疾病和死亡阴影。

随着时间的推移，对自然认识的逐步加深及科学的快速发展，人们在对抗细菌的战争中慢慢开始扭转劣势。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题需要先通过破坏菌体表面提取crtn，再用xrd解析其结构 药品和试剂 buffera: 50 mm tris 8.5 500 mm nacl 10 mm β-me bufferb: 50 mm tris 8.5 500 mm nacl 300 mm 咪唑 10 mm β-me (10 mm) bufferc: 50 mm tris 8.5 50 mm nacl 5 mm dtt 试验过程 1）破菌 50-100 ml buffera 斡旋，高压破菌； 2）离心18000r ，25min； 3）上清过镍柱。

从全菌开始每一次都取样，最后跑胶； 4）酶切 蛋白质的载体是psj2，即表达后的蛋白的n端有6个his（组氨酸）标签，这六个组氨酸和目的蛋白质之间有一段tev酶的酶切位点，我们将纯化好后的蛋白加入tev进行酶切，可以将6个his标签与目的蛋白切开。

酶切方法：将从镍柱接下的约70ml的100%b洗脱液放到透析袋里面，再将透析袋放入预冷好的1l-2l的缓冲buffer（50mm tris 8.5 ,50mm nacl）里面,放入搅拌子慢速转。