摘 要

周围神经损伤属于一种常见的创伤，可以引发严重的肢体功能障碍，还有可能留下终生残疾，出现神经损伤的患者应尽早的进行修复。人体自身神经再生的速度是非常缓慢的，长时间不受神经支配的肌肉也很容易萎缩，应用人工神经导管将加速神经修复，因此本文对人工神经导管材料进行了各项研究。

本文首先研究了两种比例的聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)材料的降解性能，对其pH值以及失重率进行了测试与分析，将筛选出的乳酸和乙醇酸比例为50:50的PLGA(PLGA 50:50)原材料继续进行静电纺丝。从链霉菌属中分离出来的他克莫司(FK506)属于大环内酯类的抗生素，它可以保护神经、阻碍神经瘢痕的产生而且可以减轻器官移植产生的排斥反应。之后本文通过细胞的MTT实验和细胞活性实验对PLGA和PLGA/FK506复合材料电纺膜的各项性能进行深入的探索，结果表明：PLGA/FK506神经导管复合原材料具有十分良好的生物降解性能以及生物相容性。

关键词：周围神经损伤；PLGA；静电纺丝；FK506

Abstract

Peripheral nerve injury is a common trauma, which can cause severe limb dysfunction and even a permanent disability. Patients with neurological injury should be under treatment as soon as possible. The natural nerve regeneration speed is very slow. Muscles not innervated are also very easy to atrophy. Application of artificial nerve conduit will accelerate nerve repair. Therefore, artificial nerve conduit materials were the research in the thesis.

In this paper, we first studied the degradation characteristics of two kinds of proportion of poly (lactic acid and ethanol) (PLGA), and the pH value and the weight loss rate were tested and analyzed. The lactic acid and ethanol acid ratio of PLGA 50:50 (PLGA 50:50) were chosen as raw materials of electrostatic spinning. Tacrolimus (FK506) isolated from the genus is a macrolides antibiotics which can protect the nerve, hinder the formation of scar tissue and relieve the rejection of organ transplantation. Then the properties of PLGA and PLGA/FK506 composites were deeply explored by means of MTT assay and cell activity test in this paper. Results show that PLGA/FK506 nerve conduits composite raw materials have very good biodegradability and biocompatibility.

Key Words: peripheral nerve injury;PLGA; electrostatic spinning;FK506

目 录

第1章 绪论 1

1.1 前言 1

1.2 周围神经损伤 1

1.2.1 周围神经损伤的分类 1

1.2.2 周围神经损伤的病理 2

1.3 周围神经损伤的修复与再生 3

1.3.1 周围神经瘢痕 3

1.3.2 周围神经损伤的修复 3

1.3.3 周围神经损伤的再生 3

1.4 周围神经的修复材料 4

1.4.1 材料的选择 4

1.4.2 天然高分子材料 4

1.4.3 人工合成材料 5

1.5 静电纺丝 5

1.5.1 静电纺丝的原理 5

1.5.2 静电纺丝的优点 6

1.6 本文研究内容 6

1.6.1 PLGA简介 6

1.6.2 FK506简介 6

1.6.3 本文研究的内容及目的 6

第2章 实验部分 8

2.1 引言 8

2.2 实验所需试剂 9

2.3 实验所需仪器 10

2.4 PLGA的降解 10

2.5 静电纺丝 11

2.6 细胞实验 11

2.6.1 细胞毒性实验 12

2.6.2 细胞活性实验 13

第3章 实验结果分析 14

3.1 PLGA的降解 14

3.1.1 降解过程中pH值的变化 14

3.1.2 降解过程中材料的失重率 14

3.2 静电纺丝纤维膜的微观结构 15

3.3 材料的细胞毒性测试 16

3.3.1 细胞MTT实验 16

3.3.2 细胞活性实验 17

第4章 结论 20

参考文献 21

致谢 24

第1章 绪论

1.1 前言

在当今社会，周围神经损伤是一种常见的多发性疾病，损伤后的神经自身再生的速度非常缓慢，这就会对损伤区域的功能恢复产生一定的影响。因此，如何加速神经再生、抑制神经瘢痕的产生成为我们当下面临的重大难题^[1]。然而组织工程学的日益发展为周围神经损伤的修复带来了新的曙光，近几年来，已经有很多方法和材料被用来进行损伤神经的修复^[2]。

1.2 周围神经损伤

1.2.1 周围神经损伤的分类

神经损伤的分类大致有三种类型分类法和五度分类法两种。

1943年，Seddon^[3]提出了神经损伤的三种类型：①神经传导功能障碍(neurapraxia)：这种障碍属于轻型神经损伤，神经纤维并不出现明显的形态变化，远端神经纤维也不出现退行性改变，传导功能于止血带麻痹数日至数周内恢复；②轴索中断(axonotmesis)：远端的髓鞘产生Waller变性，轴突断裂，神经内膜管完整，远端神经发生退行性改变，感觉丧失、肌肉萎缩，经过一段时间后恢复；③神经断裂(neurotmesis)：指神经束的完全断裂，即轴索、髓鞘和神经膜的完全横断，多为开放性，神经功能基本上完全丧失。需通过手术缝接神经进行断端对合，神经在缝合后功能的恢复可能不完全。

1968年，Sunderland^[4]对上述分类进行了相应的补充，强调了神经束结构的重要性，根据神经损伤的程度将神经损伤分为五度：①Ⅰ级损伤：髓鞘损伤但轴突完好，神经纤维依旧完整且不发生变性，轴突保持完整连续但传导受阻，受损的区域出现暂时性的传导阻滞，但这种传导阻滞的改变是可逆的，恢复速度较快且神经功能可以恢复完全，通常可以在三到四周内自行恢复；②Ⅱ级损伤：轴突中断、髓鞘受损，但轴突周围的结构完好，损伤部位的远端发生Waller变性，可以自行恢复，神经功能可恢复完全；③Ⅲ级损伤：处于神经束内的神经纤维横断，但束膜改变较少，所以神经束的连续性依然保持完整。由于部分轴突缺失以及膜内瘢痕组织的形成，部分再生的纤维不能绕过瘢痕与靶器官连接进而影响了神经的修复，神经仍可以自行恢复，但恢复并不完全；④Ⅳ级损伤：神经束断裂、轴突数量明显变少，仅神经外膜完整、神经干连，形成的束间瘢痕使再生的神经无法到达目标器官，这种情况很少能自行恢复，需手术切除瘢痕后进行修复；⑤Ⅴ级损伤：神经干完全断裂，两端完全分离，失去连续性，神经束与神经外膜也均断裂，形成断端瘢痕，神经功能无法自然恢复，需进行手术修复才能恢复。